广东坤灵净化设备有限公司
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室内温度坚持在20℃-24℃,湿度保在45%~60%,超净台洁净度应达到100级。无菌室应每月检查菌落数,无菌室或超净工作台开启的状态下,取内径90mm无菌培养皿若干,无菌操作分别注入融化并冷却至约45℃的平板计数琼脂培养基的15mL放至凝固后,倒置于36℃ ±1℃培养箱培养 48h证明无菌后,取平板 35个,分别放置在工作位置的左中右等处,开盖暴露30分钟后,倒置于36℃ ±1℃培养箱培养 48h取出检查。100级洁净区平板杂菌数平均不得超越1个菌落,10000级的洁净室平均不得超越3个菌落,如超过限度,应对无菌室进行完全消毒,直至重复检查合乎要求为止。
1无菌操作间的洁净度应达到10000级。
2无菌室应坚持清洁整齐,室内仅存放必须的检验用具如酒精灯、酒精棉、打火机、镊子、接种环、剪刀及玻璃笔等。严禁堆放杂物,以防污染。
3无菌室应备有工作浓度的消毒液 如 5%的甲酚溶液,75%的酒精,0.1%的新洁尔灭溶液等等。
4需要带入无菌室使用的仪器、药品、玻璃器皿等一切物品,均应包扎严密或应经适宜的方法灭菌。如培养皿、吸管用不锈钢筒装好在160℃-170℃的干燥箱中灭菌 1h~2h生理盐水用高压灭菌器于121℃灭菌20分钟等。
5无菌室使用前必需打开无菌室和缓冲间的紫外灯辐照30分钟以上,并且同时打开净化风机进行换气。紫外灯关闭后半小时方可进入无菌室进行工作。样品检验完毕后,应及时清理剩余样品和各种药品及玻璃器皿,平安退出后再打开所有紫外灯辐照灭菌30分钟。
6送检样品在检验前应坚持外包装完整 不得开启,以防污染。检验前,用75%的酒精棉球消毒外表面,必要时用点燃的酒精棉进行灭菌。
7每次操作过程中,均应做空白对照 以检查无菌操作的可靠性。
8吸取菌液时 必需用吸耳球吸取,切勿直接用口接触吸管,如吸管碰到手及其它未灭菌的物体,必需重新更换,以防污染。
9接种针每次使用前后 必需通过火焰燃烧灭菌,待冷却后,方可接种培养物。
10带有菌液的吸管、试管等器皿应浸泡在盛有5%的来苏儿溶液的消毒桶内消毒,24h取出冲洗;培养皿则需在高压灭菌器中重新灭菌后方可处置营养基,切记不要直接冲入下水道中,防止阻塞。如有菌液洒在桌上或地上,应立即用5%石碳酸溶液或 3%的来苏儿倾覆在被污染处至少 30min再做处理,工作衣帽等受到菌液污染时,应立即脱去,高压蒸汽灭菌后洗涤。
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